Procédure séquentielle FISH

Dans la plupart des cas, et indépendamment de la cause, si les résultats du test FISH sont inadéquats, il est possible de réhybrider les lames avec un nouveau mélange de sondes. Si la sonde présente un marquage direct, la même sonde ou une autre sonde peut être utilisée.  

Les conditions sont fondées sur des échantillons de sang périphérique.

  1. À l'aide de pinces, retirez avec précaution la lamelle des cibles précédemment hybridées.
  2. Déshydratez les lames à température ambiante en les immergeant dans une série de solutions de lavage à l'éthanol à 70 %, 85 % et 100 % pendant 1 minute chacune. Laissez sécher les lames à l'air. Les lames sont prêtes pour la répétition de l'hybridation. Il est recommandé de diminuer le temps de dénaturation des lames d'environ 50 % par rapport au temps de dénaturation original. Le temps de dénaturation ne doit toutefois pas être inférieur à 3 minutes. La réhybridation suivante ne nécessite pas d'autre réduction du temps de dénaturation.

L'intensité de la contre-coloration diminue au fil des hybridations. Toutefois, la perte est minime. Il est possible d'effectuer jusqu'à 8 hybridations répétées de la même métaphase avec des sondes différentes.

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