Préparation de tissus congelés pour la méthode FISH

Protocole standard

  • Réalisez des coupes de 5 µm sur des lames silanisées ou chargées positivement.
  • Laissez-les sécher à température ambiante pendant 15 à 30 min.
  • Fixez les lames dans du formaldéhyde 4 % dans du PBS à 0 °C pendant 15 min.
  • Lavez-les avec du PBS, lancez le protocole du kit de prétraitement à la paraffine à l'étape HCl 0,2N et continuez jusqu'à la fin.

Autre protocole

  • Réalisez des coupes comme dans le protocole suivant et laissez les lames sécher.
  • Fixez-les dans un fixateur de Carnoy (3:1, méthanol:acide acétique) pendant 5 min.
  • Lancez le protocole du kit de prétraitement à la paraffine juste avant l'étape de la protéase (tampon de lavage pendant 5 min).

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