Preparación de tejido congelado para FISH

Protocolo estándar

  • Realice cortes de 5 µm en portaobjetos silanizados o con carga positiva
  • Deje secar a temperatura ambiente durante 15-30 minutos
  • Fije en formaldehído al 4 % en PBS a 0 °C durante 15 min
  • Lave con PBS e inicie el protocolo del kit de pretratamiento de parafina en el paso de HCl 0,2 N y continúe hasta el final

Protocolo alternativo

  • Realice los cortes como antes y déjelos secar
  • Fije en fijador de Carnoy (metanol:ácido acético, 3:1) durante 5 minutos
  • Comience el protocolo del kit de pretratamiento de parafina justo antes del paso de la proteasa (tampón de lavado durante 5 minutos)

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